腺相关病毒（AAV）是体内基因递送的重要载体，被誉为基因治疗的“黄金载体”。截至2025年1月，全球已有8款AAV基因疗法获得批准，219项AAV相关疗法正在进行临床研究（数据来源于医药魔方NextPharma），展现出了强劲的发展势头。然而，AAV治疗面临的一个重大问题是患者通常只能接受单次治疗，因为首次注射AAV后引发的免疫反应会显著削弱后续的重复给药效果。因此，如何实现AAV的重复给药成为了基因治疗领域的瓶颈之一。

近期，暨南大学的李雯教授和陈功教授团队在《Molecular Therapy: Methods & Clinical Development》杂志上发表了题为《Intracranial AAV administration dose-dependently recruits B cells to inhibit the AAV redosing》的文章，首次系统阐述了脑内高剂量AAV注射诱发的免疫反应对相同血清型AAV再次给药的显著抑制作用，并探讨了其中的机制及应对策略。

研究背景

在外周组织如肝脏、肌肉使用AAV载体进行基因治疗时，“中和抗体（NAbs）”显著削弱了AAV再给药的效果，这也是限制重复给药的主要原因。以往的研究受限于血脑屏障（BBB）的存在，人们对神经系统的免疫屏障功能缺乏深入认识，甚至有文献认为脑内AAV注射不会引发类似外周的B细胞反应。

研究亮点

1. 高剂量AAV诱导淋巴细胞进入脑实质

研究发现，脑实质注射高剂量AAV后，趋化因子CXCL9和CXCL10的表达显著上调，这些分子就像“免疫信号灯”，吸引淋巴细胞进入脑实质。尽管注射并未破坏血脑屏障，但脑脊液屏障的通透性增强，导致大量免疫细胞进入脑组织并聚集在血管周围间隙。

2. B细胞与中和抗体影响重复给药

首次注射高剂量AAV后，B细胞通过产生大量中和抗体，显著抑制了同类血清型AAV的表达效率。在缺陷小鼠中，尽管高剂量AAV能够招募其他免疫细胞，但再次注射时并未受到显著抑制，表明B细胞及其产生的中和抗体在阻碍重复给药中起核心作用。

3. 更换血清型或降低剂量提升再给药效果

在不降低抗体滴度的情况下，更换AAV血清型，如将首次注射的AAV5更换为AAV9，可有效避免抗体的中和，恢复转导效率。此外，若首次注射剂量较低，也可避免触发大规模B细胞应答。

研究结果

研究发现，脑内重复给药的抑制与剂量和时间高度相关。仅当首次注射量较高且时间间隔大于14天时，第二次注射才会出现几乎“零转导”的情况。

此外，注射位点周边的小胶质细胞和星形胶质细胞显著激活，并伴随趋化因子上调，促进了B细胞的浸润与抗体的产生。推测在高剂量AAV注射后，星形胶质细胞通过异常的免疫应答导致长期抑制相同血清型AAV的再给药。

研究结论与展望

该研究明确指出，脑内高剂量AAV注射后，星形胶质细胞的激活与B细胞的聚集会抑制后续同类血清型AAV的治疗效果。因此，在设计基因治疗方案时，如何避免神经系统中触发过强的免疫反应，成为了重要的挑战。对于需求“多次给药”的脑内基因治疗，建议在治疗初期评估使用高载量的必要性。

尤其是针对特定的神经退行性疾病或需要动态表达调控的场景中，调控B细胞的免疫反应显得尤为关键。尊龙凯时(中国区)在人生的每个阶段都鼓励创造与探索，希望在未来的研究中能借鉴多发性硬化治疗中的B细胞单抗方案，以提高二次给药的效率。

此外，在不同脑区以及使用不同病毒载体的研究中，该研究为未来AAV治疗提供了重要的参考价值，帮助优化神经系统的基因治疗方案。